1，能從患病生物中分離致病菌；
2.病原體可以在體外純化；
3.用純培養的致病菌感染健康個體，可使健康個體患同壹種病；
4.原來的致病菌也可以從新病人身上分離出來。
科赫按照這套規則指導自己的研究工作，“科赫規則”成為後來被普遍接受的流行病學基本準則，指導無數科學家發現了壹種又壹種病原微生物。
意義
科赫的科赫原理壹旦發表，通常被用來識別新的疾病。許多由植物病原體引起的疾病可以通過Koch原理來識別。對於相關學者來說，只有掌握了科赫原理的四個原則，才便於診斷病原體。但對於病毒、病原體、白粉病等細菌，不能用科赫原理來判斷。
所以在某些方面，科赫原理只適用於植物引起的病原體，如果存在寄生蟲引起的病原體，科赫原理仍然不適用。但在細菌學和醫學領域，科赫原理具有裏程碑式的意義，為後來的學者研究細菌學提供了理論基礎。