固定液最早用於光學顯微鏡，但光學顯微鏡使用的沈澱和凝集蛋白固定液並不特別適合電子顯微鏡。於是人們引入了四氧化鋨和中性甲醛進行固定。在早期的電鏡生物樣品化學固定方法中，采用四氧化鋨進行單壹固定，但四氧化鋨不能很好地保存糖原等碳水化合物，四氧化鋨在組織中的滲出速度較慢(約2mm/h)。
電子顯微鏡使用的固定劑有毒，操作時要非常小心，盡量在通風櫃內完成操作。如果固定劑在實驗室泄漏，必須立即用大量奶粉覆蓋泄漏的溶液，待反應充分後收集處理。
固定劑的缺陷
固定時間不宜過長。時間過長，組織會變脆，切片困難。此外，四氧化鋨與蛋白質和不飽和脂肪酸交聯形成的絡合物都易溶於水，尤其是長期固定後。因此，用四氧化鋨固定樣品，時間控制在12小時比較合適。
四氧化鋨能與乙醇或醛類發生氧化還原反應，產生沈澱。因此，醛處理的樣品在用四氧化鋨固定前或用四氧化鋨固定後用乙醇溶液脫水前，必須用相應的緩沖液充分漂洗。