在抗原的刺激下，B淋巴細胞可以分化增殖，形成針對該抗原的特異性抗體。B細胞的這種能力和數量是有限的，不可能繼續分化增殖，所以產生免疫球蛋白的能力極小。這種B細胞與非分泌型骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞，然後進壹步克隆。這種克隆的雜交瘤細胞不僅具有腫瘤無限生長的能力，還具有產生具有特異性抗體的B淋巴細胞的能力。通過培養或註射這些克隆的雜交瘤細胞到小鼠體內，可以獲得大量的高滴度和單壹特異性抗體。這項技術被稱為單克隆抗體技術。
單克隆抗體的制備過程:
免疫動物
免疫動物是用靶抗原免疫小鼠產生致敏B淋巴細胞的過程。通常，選擇6-8周齡的雌性BALB/c小鼠，並根據預先建立的免疫計劃進行免疫。抗原通過血液循環或淋巴循環進入外周免疫器官，刺激相應的B淋巴細胞克隆、活化、增殖並分化為致敏B淋巴細胞。
細胞融合
用二氧化碳氣體殺死小鼠，無菌操作取出脾臟，在培養皿中擠壓研磨，制備脾細胞懸液。將制備的同源骨髓瘤細胞與小鼠脾細胞按壹定比例混合，加入融合促進劑聚乙二醇。在聚乙二醇的作用下，各種淋巴細胞可與骨髓瘤細胞融合，形成雜交瘤細胞。
選擇性文化
選擇性培養的目的是篩選融合的雜交瘤細胞，壹般使用HAT選擇性培養基。在HAT培養基中，未熔化的骨髓瘤細胞死亡，因為它們缺乏次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉移酶，不能通過補救手段合成DNA。未融合的淋巴細胞雖然有次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉移酶，但不能在體外長期存活，逐漸死亡。只有融合的雜交瘤細胞能在HAT培養基中存活和增殖，因為它們從脾細胞中獲得了次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉移酶，並具有骨髓瘤細胞能無限增殖的特性。
雜交瘤陽性克隆的篩選和克隆
只有少數在HAT培養基中生長的雜交瘤細胞分泌具有預定特異性的單克隆抗體，因此必須對其進行篩選和克隆。有限稀釋法通常用於克隆雜交瘤細胞。利用敏感、快速和特異的免疫學方法，篩選出能產生所需單克隆抗體的陽性雜交瘤細胞，並進行克隆和擴增。對其分泌的單克隆抗體的免疫球蛋白類型、亞型、特異性、親和力、表位、分子量等進行綜合鑒定後，及時冷凍保存。
單克隆抗體的大規模制備
大量的單克隆抗體主要是通過動物體內誘導和體外培養制備的。
體內誘導(1) BALB/c小鼠。首先腹腔註射0.5ml液體石蠟或去甲植烷進行預處理。1-2周後，將雜交瘤細胞接種於腹腔。雜交瘤細胞在小鼠腹腔內增殖，並產生和分泌單克隆抗體。約1-2周，小鼠腹部增大。用註射器抽取腹水，可獲得大量單克隆抗體。
(2)體外培養方法，在培養瓶中培養雜交瘤細胞。在培養過程中，雜交瘤細胞產生並分泌單克隆抗體，收集培養上清液，離心去除細胞及其碎片，獲得所需的單克隆抗體。然而，通過這種方法產生的抗體量是有限的。各種新的培養技術和設備不斷湧現，大大提高了抗體的產量。
單克隆抗體制備的意義:
用於後面的生命科學實驗，有醫學價值。
(1)沈澱反應:沈澱反應
(2)凝集試驗:血凝
(3)用放射免疫分析法檢測免疫復合物。
(4)流式細胞儀:用於細胞分型和細胞分離。
(5)免疫學檢測，例如5)ELISA
(6)BIAcore生物傳感器:檢測Ab-Ag或其與蛋白質的親和力。
(7)蛋白質印跡法
(8)免疫沈澱:
(9)親和層析:分離蛋白質。
用(10)磁珠進行細胞分離
(11)臨床疾病的診斷與治療；