Lb培養基配方為:1%胰蛋白腖,1%氯化鈉,0.5%酵母膏,1%瓊脂。
材料:LB培養基(1%蛋白腖,1%氯化鈉,0.5%酵母膏,1.2%瓊脂)50mL細菌培養皿,大腸桿菌DH5a(或其他抗生素如卡那,簡稱,但耐藥基因發生相應變化)工程菌株3株,轉化Amp(氨芐青黴素)菌株1株。以下簡稱AMP-R(氨芐西林耐藥),取100μL(細菌密度:OD約0.6-0.8);另壹個長度相近,沒有氨芐青黴素抗性基因的質粒是大腸桿菌(以下簡稱AMP-S),取200μL。(細菌密度:OD約0.6-0.8)工藝:以下操作均在潔凈室進行。1,將LB培養基在濕熱壓力下鋪板滅菌,在三個培養皿中各加入10mL,編號為A、B、C;2.添加抗生素。在固化前向培養皿A和B中加入濃度為100μg/mL的氨芐青黴素,但不加入培養皿c中。接種實驗組:接種Amp-r菌株100μ l陰性對照:在培養皿B中接種AMP-R菌株100μ l陽性對照:在培養皿c中接種AMP-R菌株100μL陽性對照。在37度培養箱中培養12-10理論預期的實驗結果顯示,實驗組A和陽性對照組C有大量菌落,而陰性對照組B無菌落或僅有壹兩個菌落生長(因為自發突變產生氨芐青黴素耐藥性的可能性仍然存在)。證明抗生素能有效抑制敏感菌株的生長,而耐藥菌株無效。答案都是根據我的實驗經驗手寫的,原創。