光學顯微鏡的分辨率由物鏡的分辨率決定，物鏡的分辨率由其數值孔徑和照明光的波長決定。
使用普通中心照明法(使光線均勻穿過標本的明亮照明法)時，顯微鏡的分辨距離為d=0.61λ/NA。
d:物鏡的分辨距離，單位為nm。
λ:照明光的波長，單位為納米。
NA:物鏡的數值孔徑
比如油浸物鏡的數值孔徑是1.25，可見光的波長範圍是400-700 nm。如果平均波長為550 nm，d=270 nm，約為照明光波長的壹半。
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