大腸桿菌大部分附著在人和動物的腸道上,會隨人和動物的腸道排泄物排出體外,彌散到自然環境中。少量的大腸桿菌是有毒的。大腸桿菌感染是引起腹瀉的主要原因,因此采用先進的方法快速檢測大腸桿菌是提高食品安全的有效途徑,也是保障人民生命安全的重要措施。
1,大腸桿菌感染的定義
大腸桿菌的感染主要分為腸道感染和腸外感染。引起腸道感染的大腸菌群主要是由汙染的食物進入口腔引起的。主要引起腹瀉癥狀,嚴重的會導致患者脫水,血壓下降。比如嬰兒會流行性腹瀉,遊客會拉肚子,都是因為大腸桿菌感染引起的疾病。
腸外疾病主要是由肝外化膿和炎癥引起,如尿路感染、新生兒腦膜炎等,會導致腸外感染。腸道外感染後,人體的癥狀大多是抵抗力下降或外傷。這些感染可以通過相關的腸道手術或抗生素來控制,但必須檢測大腸桿菌,這就需要了解相關的檢測方法。
2、大腸桿菌的檢測方法
首先,多管發酵法是基於大腸桿菌可以發酵乳糖產酸產氣的特性,在45℃左右的培養基上培養壹天,就可以釋放出熒光產物使培養基在紫外光照射下發出熒光,這種方法可以檢測樣品中是否含有大腸桿菌。但由於這種方法非常簡單,容易受到其他因素的幹擾,影響結果的準確性;
②濾膜法是壹種非常常見的檢測水中大腸桿菌的方法,即在壹定的水樣中註入濾膜進行過濾,過濾後水中的細菌會留在濾膜上,濾膜在專業培養基上培養壹天,即24小時,溫度保持在37℃。發酵後,大腸桿菌產生的乳糖會使濾膜呈現紫色,然後計算大腸桿菌的數量。這種方法雖然成本低,原理簡單,但檢測時間長,步驟復雜。經過長期的培養,需要進行數據計算,所以只適合少量數據的分析。
③平板計數法是壹種有效的細菌計數方法。將分析後的樣品稀釋,然後將微生物分散成壹個個個體,取出壹定量的溶液進行培養,使其生長成肉眼可見的菌落,然後通過稀釋液的濃度和樣品的數量計算出細菌的數量。但由於測量的樣本不壹樣,生長的菌落不壹樣,需要的時間也不壹樣,所以計算結果不具有代表性,效率很低。
④細菌分離鑒定也可檢出大腸桿菌。首先,應采集感染者的尿液、血液和糞便樣本。糞便樣本可直接接種腸桿菌。將血液富集,然後轉移到血瓊脂平板上,與其他腸桿菌壹起培養。在37℃培養24小時後,用顯微鏡觀察觀察菌落的染色,最終確定是否為大腸桿菌。通過檢查糞便中的細菌總數,當發現糞便中的細菌總數超過,
⑤以上方法都需要壹定的時間,效果也不是特別明顯。在現代生物技術飛速發展的今天,大腸桿菌的快速檢測方法有很多,PCR檢測技術是首選。它的全稱是聚合酶鏈式反應,是壹種在體外用酶促進特殊DNA片段的方法。用熒光定量法最快可在2小時內檢測出大腸桿菌的含量。
這種方法非常簡單省時,但是也有壹些缺點,就是在核酸純化的過程中會出現壹些多余的產物,會造成誤差,對結果有壹定的影響,但是不會造成特別嚴重的影響;
⑥然後是基因芯片技術,是利用基因和壹些程序對大腸桿菌中的核酸物質進行高效快速的分析方法。它把各種基因放在芯片表面,檢測後檢測大腸桿菌的數量。但這種方法使用的儀器設備價格昂貴,而且大腸桿菌檢測後,檢測出的物質也會造成汙染,所以這種技術目前在國內還沒有大規模使用;
⑦ DNA探針技術稱為分子雜交技術,其原理是利用DNA分子性質的變化來分析大腸桿菌。壹般有同位素檢測法和非同位素檢測法,但同位素檢測法由於標記因子具有放射性,不適用於食品檢測。非同位素標記可用於檢測人體或食品中的大腸桿菌,非常方便,但DNA探針技術由於操作復雜,只能在實驗室進行,具有局限性;
⑧免疫分析技術,其原理是基於抗原和抗體的反應。首先是免疫熒光技術,通過直接標記特異性熒光抗體,間接將抗體溶液滴在被檢測樣品上,檢測大腸桿菌。這種方法快速準確,非常適合現實生活。
⑨最後是代謝快速檢測技術,主要檢測細菌的代謝產物,然後分析判斷是否有大腸桿菌。
以上檢測大腸桿菌的方法都需要結合使用,因為單獨使用會有壹定的誤差。只有兩者壹起使用,才能準確檢查大腸桿菌,得到準確的結果。
3.如何預防大腸桿菌感染
大腸桿菌會對人的健康造成危害,檢測方法非常復雜,那麽如何通過有效的手段預防和減少大腸桿菌感染呢?
首先在準備食物的時候要註意衛生,尤其是做飯的時候壹定要徹底清洗幹凈,同時飲用水壹定要燒開,防止做飯的水和食物被感染。其次,在公共場所遊泳時,也要有相關的防範意識,出泳池後要洗澡,以減少感染的機會,養成良好的衛生習慣,勤洗手,保持手的清潔,尤其是上完廁所後。
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